Các môi trường này được sử dụng để xét nghiệm những vitamin, axit amin và kháng sinh. Ví dụ : môi trường xét nghiệm kháng sinh được sử dụng để xác lập hoạt lực kháng sinh bằng kỹ thuật xét nghiệm vi sinh. Các loại môi trường khác gồm có :Môi trường Robertson Cooked Meat ( RCM ) thường được sử dụng để nuôi Clostridium spps chứa một cột thịt bò đực 2,5 cm và 15 ml nước dùng dinh dưỡng .1. Môi trường chung / Môi trường cơ bản Môi trường cơ bản là môi trường đơn thuần tương hỗ hầu hết những vi trùng không khó chiều chuộng. Môi trường nuôi cấy vi sinh peptone water, nutrient broth and nutrient agar được coi là môi trường cơ bản. Các môi trường này thường được sử dụng để phân lập sơ bộ những vi sinh vật .
Môi trường nuôi cấy vi sinh vật được phân biệt trên dựa trên cơ sở độ đặc, thành phần và mục đích sử dụng.
III. Phân loại môi trường nuôi cấy vi sinh vật dựa trên mục đích / chức năng sử dụng / ứng dụng
Nhiều môi trường đặc trưng là thiết yếu để dễ nhận diện, định lượng và phân lập một số ít loại vi trùng nhất định. Để phân phối nhu yếu này, rất nhiều môi trường có sẵn .
1. Môi trường chung / Môi trường cơ bản
peptone water nutrient broth and
Môi trường cơ bản là môi trường đơn giản hỗ trợ hầu hết các vi khuẩn không khó tính. Môi trường nuôi cấy vi sinh , nutrient broth and nutrient agar được coi là môi trường cơ bản. Các môi trường này thường được sử dụng để phân lập sơ bộ các vi sinh vật.
2. Môi trường tăng sinh (Các yếu tố tăng trưởng bổ sung):
Thêm các chất dinh dưỡng bổ sung dưới dạng máu, huyết thanh, lòng đỏ trứng, vv vào môi trường cơ sở để tạo thành môi trường tăng sinh. Môi trường tăng sinh được sử dụng để phát triển vi khuẩn cần dinh dưỡng (khó tính). Blood agar, chocolate agar, Loeffler’s serum slope vv là một số môi trường tăng sinh. Thạch máu được chuẩn bị bằng cách thêm 5-10% (theo thể tích) máu vào môi trường blood agar base. Chocolate agar còn được gọi là thạch tan huyết
3. Môi trường tăng sinh và chọn lọc:
Được ứng dụng để ngăn chặn vi khuẩn không mong muốn hoặc vi khuẩn lây nhiễm và giúp khôi phục mầm bệnh từ hỗn hợp vi khuẩn. Có khi môi trường chọn lọc là agar, có khi môi trường tăng sinh là chất lỏng. Cả hai môi trường này đều áp dụng cùng mục đích. Bất kỳ môi trường thạch nào cũng có thể trở thành chọn lọc bằng cách bổ sung các tác nhân ức chế nhất định không ảnh hưởng đến vi sinh vật mục tiêu. Các phương pháp khác nhau để tạo môi trường bao gồm việc bổ sung kháng sinh, thuốc nhuộm, hóa chất, thay đổi pH hoặc kết hợp các chất này.
a. Môi trường chọn lọc
Nguyên tắc: ức chế tăng trưởng khác nhau
Môi trường chọn lọc được ứng dụng để ngăn chặn sự tăng trưởng của một số vi sinh vật mà vẫn cho phép sự phát triển của những vi sinh vật khác. Môi trường chọn lọc dạng thạch (rắn) để phân lập các khuẩn lạc riêng rẽ
Ví dụ về môi trường chọn lọc bao gồm:
- Thayer Martin Agar dùng để phục hồi Neisseria gonorrhoeae chứa kháng sinh; vancomycin, colistin và nystatin.
- Mannitol Salt Agar và Salt Milk Agar dùng để hồi phụcaureus chứa 10% NaCl.
- Kali tellurite vừa được sử dụng để phục sinh diphtheriaechứa 0,04 % kali tellurite .
- Macaronkey Agar được sử dụng cho các thành viên Enterobacteriaceae có chứa muối mật mà ức chế hầu hết các vi khuẩn gram dương.
- Pseudosel Agar ( Cetrimide Agar ) được sử dụng để phục sinh aeruginosachứa cetrimide ( chất khử trùng ) .
- Crystal Blood Blood Agar được sử dụng để phục sinh pyogeneschứa 0.0002 % tinh thể tím .
- Lowenstein Jensen Phương tiện được sử dụng để phục hồituberculosis được chọn lọc bằng cách kết hợp malachite green.
- Wilson và Blair’s Agar để hồi sinh typhiđược tinh lọc bằng cách bổ trợ thuốc nhuộm màu xanh lục sáng .
-
Môi trường chọn lọc như TCBS Agar được sử dụng để phân lập cholerae từ mẫu phân có pH cao (8,5-8,6), ức chế hầu hết các vi khuẩn khác.
-
Môi trường nuôi cấy tăng sinh
Môi trường tăng sinh được sử dụng để tăng mật độ tương đối của một số vi sinh vật trong môi trường nuôi cấy trước khi cấy trên môi trường rắn chọn lọc. Không giống như môi trường chọn lọc, môi trường tăng sinh thường được sử dụng như môi trường canh . Môi trường tăng sinh là môi trường lỏng cũng ứng dụng để ức chế vi sinh vật cộng sinh trong mẫu lâm sàng. Selenite F broth, tetrathionate broth and alkaline peptone water (APW) được sử dụng để phục hồi lại các mầm bệnh từ các mẫu phân.
4. Môi trường đặc trưng/ chỉ thị:
Hình dạng đặc trưng:
Môi trường này được vận dụng cho những vi trùng khác nhau hoàn toàn có thể được nhận diện dựa trên sắc tố khuẩn lạc. Các cách tiếp cận khác nhau gồm có việc tích hợp thuốc nhuộm, chất nền trao đổi chất, vv để những vi trùng sử dụng chúng Open dưới dạng những khuẩn lạc có màu khác nhau. Môi trường đặc trưng được cho phép sự tăng trưởng của nhiều hơn một vi sinh vật chăm sóc nhưng với những khuẩn lạc phân biệt hình thái .
Ví dụ về môi trường đặc trưng bao gồm:
- Mannitol salt agar (lên men mannitol = màu vàng)
- Blood agar (các loại tán huyết khac1 nhau như tán huyết α, β và γ)
- Mac Conkey agar (lên men lactose, các khuẩn lạc hồng vì không lên men lactose tạo ra các khuẩn lạc nhạt hoặc không màu.
- TCBS ( Vibrio cholerae tạo ra các khuẩn lạc màu vàng do lên men sucrose)
5. Môi trường luân chuyển
Các mẫu lâm sàng phải được luân chuyển đến phòng thí nghiệm ngay sau khi tích lũy để ngăn ngừa sự tăng trưởng quá mức của những sinh vật gây ô nhiễm hoặc những vi sinh vật cộng sinh. Điều này hoàn toàn có thể đạt được bằng cách sử dụng môi trường luân chuyển. Như môi trường giúp ngăn ngừa khô ( khô ) vật mẫu, duy trì mầm bệnh ở hệ cộng sinh và ức chế sự tăng trưởng quá mức của vi trùng không mong ước. Những môi trường này như ( Stuart và Amie ) là bán rắn. Bổ sung than để trung hòa những yếu tố ức chế .
- Môi trường vận chuyển Cary Blair và môi trường Venkatraman Ramakrishnan (VR) được sử dụng để vận chuyển phân từ bệnh nhân bị nghi ngờ bệnh tả.
- Sach’s buffered glycerol saline được sử dụng để luân chuyển phân từ những bệnh nhân hoài nghi bị bệnh lỵ trực khuẩn .
- Môi trường Pike được sử dụng để luân chuyển streptococci từ vật mẫu cổ họng .
6. Môi trường kỵ khí
Vi khuẩn kỵ khí cần môi trường đặc biệt quan trọng để tăng trưởng vì chúng cần hàm lượng oxy thấp, khử thế oxy hóa khử và bổ trợ những chất dinh dưỡng .Môi trường cho vi trùng kỵ khí hoàn toàn có thể được bổ trợ chất dinh dưỡng như hemin và vitamin K. Môi trường này cũng hoàn toàn có thể được khử bằng yếu tố vật lý hoặc hóa học. Đun sôi môi trường để vô hiệu hết oxy hòa tan. Bổ sung 1 % glucose, 0,1 % thioglycollate, 0,1 % axit ascorbic, 0,05 % cysteine hoặc những chất sắt nóng đỏ hoàn toàn có thể làm cho môi trường bị khử. Trước khi sử dụng, môi trường phải được đun sôi trong nồi cách thủy để vô hiệu oxy hòa tan và sau đó bịt kín bằng parafin lỏng vô trùng .
Môi trường Robertson Cooked Meat (RCM) thường được sử dụng để nuôi Clostridium spps chứa một cột thịt bò đực 2,5 cm và 15 ml nước dùng dinh dưỡng.thường được sử dụng để nuôi Clostridium spps chứa một cột thịt bò đực 2,5 cm và 15 ml nước dùng dinh dưỡng .
Thioglycollate broth chứa natri thioglycollate, glucose, cystine, chiết xuất men và casein thủy phân.
Methylen blue hoặc resazurin là một thông tư oxy hóa khử được tích hợp trong môi trường. Trong điều kiện kèm theo khử, methylene blue không màu .
7. Môi trường phân tích
Các môi trường này được sử dụng để xét nghiệm những vitamin, axit amin và kháng sinh. Ví dụ : môi trường xét nghiệm kháng sinh được sử dụng để xác lập hoạt lực kháng sinh bằng kỹ thuật xét nghiệm vi sinh .
Các loại môi trường khác gồm có :
- Môi trường để định lượng vi trùng .
-
Môi trường để phân lập vi khuẩn.
- Môi trường dữ gìn và bảo vệ, v.v …
Trên đây là những loại môi trường nuôi cấy vi sinh vật được phân loại theo mục tiêu sử dụng. Để xem lại phần 1, phân loại môi trường nuôi cấy vi sinh theo độ đặc hay thành phần, mời quý anh chị và những bạn nhấp vào link này .Công ty Trách Nhiệm Hữu Hạn Khoa Học Kỹ Thuật Việt Sinh rất vui được tương hỗ hết mình khi người mua có vướng mắc ; liên hệ với chúng tôi qua gmail : [email protected] hoặc gọi trực tiếp đến hotline : 0919112141 hoặc 0916072323 .
